尿蛋白测定（双缩脲法）

一、实验目的

1、加深对尿蛋白及其测试意义的认识。

2、掌握双缩脲法测定尿蛋白的原理和操作方法。

3、学习使用离心机，掌握分光光度计的使用，初步了解比色法的基本原理。

二、实验原理

蛋白质是含氮的有机高分子化合物，分子中含有多个与双缩脲分子相似的结构（肽健），在碱性硫酸铜溶液中，蛋白质与硫酸铜的Cu2+离子等络合生成紫色络合物，其颜色深浅与蛋白质含量成正比，经光电比色可求出尿中蛋白质的含量。

三、器材

721分光光度计、离心机、离心管、移液管、玻璃棒、洗耳球、一次性尿杯

四、试剂

1、1.5％钨酸钠溶液 2、0.15Ｎ硫酸 3、双缩脲试剂 4、生理盐水

五、操作步骤：

1、用尿杯取尿液少许

2、移取尿液5ml于离心管中 （b1）

3、加入0.15Ｎ硫酸2.5 ml （b2）

4、加入1.5％钨酸钠溶液2.5 ml （b3）

5、混匀后离心5 min（3000r/min）后倾去上清液

6、在沉淀中加生理盐水至1ml （b4）

7、加入双缩脲试剂 4 ml （b5）

8、混匀后放置20—30分钟，用波长540nm进行比色，以试剂作为空白管调零，分别读取标准管和

测定管的吸光度

六、计算

七、正常值：每天150mg以下，任意尿少于15 mg以下。