尿素氮的测定（二乙酰一肟法）

尿素氮的测定（二乙酰一肟法）

一、目的与要求

掌握血清尿素氮的测定原理和方法；了解尿素氮测定的临床意义及正常值。

二、原理

血液中的尿素在强酸性条件下与二乙酰一肟共热反应，生成红色复合物，与同样处理的尿素标准液进行比色，即可求出血液中尿素氮含量。

三、试剂

1、二乙酰一肟 2、酸混合液 3、10％三氯醋酸 4、蒸馏水

四、器材

721分光光度计、离心机、三用水箱、采血针、吸血管及胶头、棉签、离心管、普通试管、具塞试管、移液管

五、操作步骤

1、在5 ml离心管中加入0.48ml蒸馏水  （C1）

2、采20ul全血，加入离心管中混匀

3、加入10％三氯醋酸0.5 ml          （C2）

4、离心10min（3000r/min）

5、将上清液倒入另一支试管中

6、取上清液0.5 ml于另一支具塞试管中（C3）

7、加入二乙酰一肟0.5 ml            （C4）

8、加入酸混合液4 ml                （C5）

9、置于沸水浴中，准确煮沸10min

10、流水冷却后，以空白管调零，用波长500nm比色测定。

六、计算公式

七、正常参考值范围： 3.227—7 mmol/L