721分光光度计的使用技术

721分光光度计的使用技术

1、原理

分光光度计是应用分光光度法（即比色法）测定物质含量（即浓度）的仪器。具有操作简便，灵敏度高等优点。当利用比色法测定溶液中某种化学成分时，通常需加入某种显色剂，使其产生有色化合物，而且其颜色的深浅与待测化学成分的含量成正比，据此测定待测物的浓度。分光光度法的原理及计算公式均是依据Lambert-Beer定律，即一束单色光通过一溶液时，由于溶液吸收一部分光能，使光的强度减弱，若溶液的浓度（或厚度）不变，则溶液的厚度（或浓度）愈大，光线强度的减弱也愈显著。

分光光度计通常是把溶液的厚度固定不变，通过光密度值表现溶质的浓度。若用待测物的纯品配置不同的浓度，测出其光密度，绘出浓度对光密度的工作曲线，便可以此查得未知样品的浓度，还可依据下列公式对未知样品的浓度通过计算得出。

2、操作规程

⑴ 打开电源，预热10min

⑵ 依次将待测样品放入暗合，盖好暗合盖。

⑶ 选定波长：调节波长选择钮至所需数值。

⑷ 调0：调节暗电流旋钮，使电流计指针至透光率0。

⑸ 调100%：将空白液置于被测位置，调节光量调节旋钮，使电流计指针至透光率100，此时的光密度为0。

⑹ 移动定位拉杆，分别测量样品，记录光密度值。

3、注意事项

⑴ 分光光度计属精密仪器，应精心维护，防震、防潮、防腐蚀。

⑵ 比色杯要保持清洁，其透光面忌用手触摸或接触粗糙物体，比色杯中的液体应适量，外壁要用擦净纸擦干，如杯中溶液为强酸或强碱，应尽快比色，以防腐蚀比色杯。

⑶ 比色时间应尽量缩短，以防光电系统疲劳。

⑷ 用后应将所有开关、旋钮移至原位，关闭电源，清洗比色杯，倒置于比色杯架上晾干。